Seahorse 检测服务全新升级
利用高灵敏度的细胞外氧气与H+流量变化检测技术,实时完成线粒体呼吸和糖酵解的测量,借助全自动药物加注,通过测定细胞外酸化率ECAR和氧气消耗速率OCR可以测得细胞有氧呼吸与糖酵解的基础水平、最高/最低水平及能量储备水平,从而绘制出完整的"压力曲线",作为细胞能量代谢的黄金标准,已经广泛应用于肿瘤、糖尿病、神经退行性疾病、心血管疾病、免疫学研究、干细胞研究、药物发现与筛选等多个方向。
Seahorse 检测的应用优势
1. 实时动态监测,揭示生命过程的真相:它能够全程监测活细胞在数分钟至数小时内的连续代谢变化。
2. 无标记、非侵入,数据源于细胞最真实的状态:通过物理传感器直接测量细胞外的代谢产物(氧气、质子),确保细胞在研究过程中保持完整性(零损伤),无需裂解或染色,反映最真实的生理状态。
3. 同步、多参数分析:仅需一次实验即可同步测量细胞的有氧呼吸(OCR) 和糖酵解(ECAR),并计算得出基础代谢率、最大呼吸能力、ATP 生成速率等十几种关键指标,实现对细胞能量代谢状态的全面解析。
4. 极高的灵敏度与广泛的样本适用性:样本需求量极少,每孔仅需5,000至10,000个细胞即可获得高灵敏度结果。
5. 应用广泛:肿瘤代谢、干细胞研究、免疫学研究、类器官研究、药物筛选、神经退行性疾病等。
基恩科生物Seahorse 检测服务升级
1. 8通道/96通道灵活搭配
8通道/96通道零活搭配,满足低通量,高通量实验。8通道适合于原代细胞,T细胞,单核细胞等珍贵细胞检测和FCCP浓度摸索实验。96通道适合常规细胞,分组较多实验。
2. 自有细胞库/病毒库提供,结果可靠
建立自有标准细胞库和工具病毒库,客户可直接选用。
3. 技术团队1对1服务
实验设计有疑问?不存在。检测那个指标不确定?不存在。检测结束不会看数据?不存在。基恩科生物推出 1V1 技术支持!一起和您分析实验数据里的门道。
4. 检测指标多样
线粒体压力测试

检测指标:
基础呼吸 (Basal respiration):用来满足细胞ATP需求和线粒体质子渗漏的氧消耗,细胞维持正常生理功能的基础能量需求。
ATP 产生 (ATP Production):加入 ATP 合酶抑制剂寡霉素后减少的氧气消耗速率,代表基础呼吸中被用来驱动ATP产生的部分。用于合成ATP的耗氧量,反映线粒体产能效率。
H+(质子)渗漏 (H+ Proton leak):与 ATP产生不偶联的基础呼吸的剩余部分,反映线粒体内膜完整性及偶联效率
质子渗漏可以被看作是线粒体损伤的标志。
最大呼吸 (Maximal respiration):加入解偶联剂FCCP之后获得的最大氧气消耗速率。FCCP 通过刺激呼吸链以最大能力运转模拟生理的 “能量需求”,导致底物(糖、脂肪和氨基酸)的快速氧化以应对这一代谢挑战,显示线粒体应对极端能量需求时的最大工作能力。
备用呼吸能力 (Spare respiratory capacity):这个测量指标表示细胞应对能量需求的能力以及细胞呼吸与其理论最大值的差距,是细胞在面临压力时可调动的额外能量储备,是衡量“健康”与否的关键指标。
非线粒体呼吸 (Nonmitochondrial respiration):加入鱼藤酮和抗霉素A后,由于一部分细胞中的酶继续消耗氧而存留的氧消耗。是评估实验背景的重要基线。
棕榈酸酯氧化压力测试

检测指标:
基础FAO呼吸(Basal FAO):在缺乏葡萄糖等其他外源性底物时,细胞为维持基础生理功能而进行脂肪酸氧化的耗氧量。它反映了细胞对脂肪酸的基础能量需求。
急性响应(Acute Response):加入乙莫克舍后OCR的即时下降值(ΔOCR)。在基础状态下这一变化可能较小,但它是评估细胞正在进行的FAO活性的直接证据。
最大FAO能力(Maximal response):加入FCCP后细胞能达到的最大耗氧率。它衡量了细胞在能量需求剧增时,能调动多大潜能的FAO通路来应对挑战,是反映FAO储备能力。
备用FAO能力(Inhibited maximal):通过计算“最大呼吸”减去“基础呼吸”得出,表示细胞在应急状态下额外动用的FAO通量储备
非线粒体呼吸(Non-mitochondrial oxygen consumption):加入鱼藤酮/抗霉素A后残留的耗氧率,作为背景值用于校正。
糖酵解压力检测

分析指标:
基础糖酵解速率(Glycolysis):细胞为维持基础生理功能而进行的糖酵解速率,反映了细胞的基础能量代谢需求。
糖酵解容量(Glycolytic capacity):当线粒体ATP产生被抑制后,细胞所能达到的最大糖酵解速率。代表了细胞糖酵解通路的最大工作潜能。
糖酵解储备(Glycolytic reserve):糖酵解容量与基础糖酵解的差值。体现了细胞在面对应激时,通过提升糖酵解活性来满足额外能量需求的缓冲能力。
非糖酵解酸化(Non-glycolytic acidification):在完全剥夺葡萄糖后仍存在的残留酸化水平,主要来自TCA循环等相关过程产生的H+。
糖酵解速率测定

分析指标:
基础糖酵解(Basal glycolysis):生理状态下,细胞维持基础功能的持续性糖酵解水平,反映正常状态下细胞对糖酵解途径的基础能量依赖程度。
代偿糖酵解(Compensatory glycolysis):加入鱼藤酮/抗霉素A抑制线粒体呼吸后,细胞能达到的最大糖酵解速率,衡量细胞面对线粒体功能被抑制等压力时,通过糖酵解途径来代偿供能的最大潜力和储备能力。
总质子释放(Total Proton Efflux):细胞随时间向外部分析培养基中释放的质子总数量,糖酵解与氧化磷酸化(OXPHOS)都会产生质子。
糖酵解质粒释放(Glycolytic proton Efflux):扣除线粒体来源酸化后,真正反映糖酵解速率的直接指标,可以线性反映细胞乳酸生成的绝对速率。
实时 ATP 生成速率测定

分析指标
线粒体ATP生成速率 mitoATP Production Rate
糖酵解ATP生成速率 glycoATP Production Rate
总ATP生成速率 Total ATP Production Rate