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病毒样颗粒蛋白(VLP)

     

 病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)指含有某种病毒的一个或多个结构蛋白的病毒颗粒,不含有核酸病毒,俗称伪病毒颗粒或假病毒颗粒。病毒样颗粒分为无囊膜和有囊膜VLP。无囊膜的VLP指衣壳蛋白单独表达即可以组装成VLP结构,如猪细小病毒VP2蛋白,人乳头状瘤病毒L1蛋白等。有囊膜VLP指包含有宿主细胞的细胞膜成分,囊膜成分覆盖于VLP表面,与天然病毒具有相似的结构和功能,如乙型肝炎病毒VLP,病毒肝炎病毒VLP等。大多数VLP的空壳结构为二十面体或螺旋结构,由几种特定的结构蛋白组成,它被广泛用于疫苗生产和抗原呈递。


       基恩科VLP包装基于HEK293、Vero、MDCK的哺乳动物包装体系,包装的VLP更接近蛋白的天然结构,尤其有囊膜的膜蛋白VLP,可以更好的进行蛋白表型如抗原抗体筛选、噬菌体展示、酵母展示、免疫原产生和配体结合测、靶向药物筛选等应用研究。其次,通过不断的包装体系优化,物理结构上VLP具有更好的均匀度,能够保持高密度靶蛋白的天然结构。创新的VLP包装系统,可以满足不同生物结构的蛋白包装,可为客户提供量身定制VLP包装服务。


一、不同调控方式下的包装服务

1.膜蛋白(Membrane Protein VLP)的表位表达
       膜蛋白由于多跨膜结构域结构复杂,表达量低,体外表达纯化制备困难,体外保存稳定性差、细胞过表达存在空间阻力(因为膜蛋白要镶嵌进细胞膜才能有活性)等因素对膜蛋白的高表达产生了极大的挑战。基恩科生物基于VLP平台技术,能够将膜蛋白完整的展示在目的细胞膜的表面,极大地增加了膜蛋白的表达量。
2.核/质蛋白包装服务
       基恩科生物提供的VLP包装服务不仅可以将膜蛋白完整的表达在细胞膜上,还可以将其他非膜蛋白准确的递送进细胞质和细胞核,有效逃逸核内体-溶酶体对蛋白的降解,且蛋白活性不受影响。
3.生物素化蛋白VLP包装服务
       基恩科可以在VLP包装过程中,在目的蛋白表达盒上加AVI标签,进行目的蛋白的生物素标记。生物素连接到目标分子的AVI标签上,具有很好的特异性。另外由于生物素很小,影响蛋白本身的活性或空间结构的可能性很小。基于VLP的生物素-蛋白包装可以作为很好的研究材料,广泛应用于各种蛋白互做研究。


二、质量控制
       基恩科生物(GeneCarer)结合《中国药典》,多糖结合病毒疫苗中针对疫苗制剂等提出的产品质量和安全性的要求,同时针对细胞实验用病毒颗粒/动物实验用病毒颗粒/临床用病毒的不同需求,建立企业假病毒颗粒产品质量标准,每一批假病毒颗粒产品都经过质量部严格检测,测定病毒样颗粒蛋白的质量、纯度和粒度均一度等检测。

检测项目

检测方法

质量标准参考结果

颜色

肉眼判定

无色

澄清度

肉眼判定

透明,无异物

粘稠度

移液器吸取

无粘稠和吸液滞后现象

PH

笔式PH计

7.2-7.4

细菌

平板培养法

阴性

真菌

平板培养法

阴性

支原体

Nest PCR

阴性

内毒素

鲎试剂

≤50TU/mL



三、基恩科生物在VLP包装中的优势
A.多样化:不同细胞平台,不同包装平台,客户量身定制;
B.周期短,最快3-4周,确保顺利交付;
C.膜蛋白、细胞质蛋白、核定位蛋白均能保证活性;
D.靶抗原丰度高于稳转细胞系丰度。


四、现货产品
       基于VLP技术平台,基恩科生物已开发出部分成熟的VLP现货产品,均经过细胞水平验证。保证膜蛋白和因子活性水平。 


货号

靶点

全称

GC160400131

VLP-ZSgreeen

VLP-GFP((荧光阴性对照)

GC160400132

VLP- CLDN6-6

CLDN6 蛋白病毒样颗粒

GC160400133

VLP-Claudin-6-GFP

VLP-Claudin-6-GFP 蛋白病毒样颗粒

GC160400134

VLP-Spondin1

Spondin1因子蛋白病毒样颗粒

GC160400135

VLP-Spondin1-GFP

Spondin1-GFP因子蛋白病毒样颗粒

GC160400136

VLP-mGRM7

小鼠 GRM7/GluR7蛋白病毒样颗粒

GC160400137

VLP-mGRM7-GFP

小鼠 GRM7/GluR7-GFP蛋白病毒样颗粒

GC160400138

VLP-mCCR9

小鼠 CCR9蛋白病毒样颗粒

GC160400139

VLP-mCCR9-GFP

小鼠 CCR9-GFP蛋白病毒样颗粒