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双荧光素酶实验

       服务简介
       在生物体内DNA的转录是基因表达的关键过程,基因表达调控主要发生在转录水平。基因顺式作用元件(启动子)和转录因子相互作用,对基因的调控表达,将直接影响下游信号通路功能的实现。基因调控的研究将是今后相当长一段时间内功能基因组学研究的热点之一。双荧光素酶报告基因检测(Dual- Luciferase reporter assay,DR)已成为研究转录因子参与基因调控的有效手段,通过对启动子DNA片段的分析,验证启动子结合元件的反式激活能力,探讨转录因子在信号转导中的分子机制。

       服务内容
       启动子预测:
       根据客户提供的基因ID号检索目的基因的启动子区,根据相关软件预测和分析启动子核心区及序列;

       启动子荧光载体构建:
       以预测的启动子核心区序列为模板设计特异性引物,PCR扩增启动子序列,构建启动子的重组荧光基因报告载体(pGL3或pGL4.10);
       细胞转染和荧光值检测:
       启动子荧光基因载体与对应转录因子表达载体共转染目标细胞(例如293细胞),转染48小时进行双荧光值检测;

       服务流程


       交付内容
       提供启动子荧光重组载体及甘油菌株;
       提供双荧光基因报告实验技术报告(包括实验步骤,载体构建,荧光基因报告实验结果);