NIH3T3 (小鼠胚胎细胞)-西安基恩科生物科技有限公司

产品描述

NIH3T3 (小鼠胚胎细胞)是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触性抑制的连续传代细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株，建立的NIH/3T3细胞株又进行了5轮以上亚克隆。NIH/3T3细胞对肉瘤病毒的转化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，对DNA转化及转染研究十分有用；NIH/3T3细胞鼠痘病毒阴性。

基本信息

细胞别称	NIH/3T3; NIH-3T3; NIH3T3; 3T3; 3T3NIH; 3T3-Swiss; Swiss-3T3; Swiss/3T3; Swiss 3T3; Swiss3T3
细胞来源	胚胎
细胞形态	成纤维细胞样
细胞类型	自发永生化细胞
生长特性	贴壁细胞
安全等级	BSL1
包装规格	T25瓶或者1mL冻存管包装
倍增时间	2~3天
传代比例	1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
保藏机构	ATCC; CRL-1658 ATCC; CRL-6442DSMZ; ACC-59 ECACC; 93061524

【培养保存】
培养体系：α-MEM+10%FBS+1%PS
培养条件：气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃
冻存条件：基础培养基+10%DMSO+20%FBS，液氮保存
【传代步骤】
当细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
(1).弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次；
(2).加1ml消化液于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化2-4分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加胰酶3倍体积的培养基终止消化；
(3).用巴氏管轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加入培养液后吹匀；
(4).收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。
【冻存步骤】
（1）.细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入3ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数；
（2）.5min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10(6)/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识；
（3）.将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取

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