C8-D1A(小鼠小脑组织细胞)-西安基恩科生物科技有限公司

产品描述

C8-D1A(小鼠小脑组织细胞)细胞是从出生8天的C57BL/6小鼠小脑的外植体培养中建立的具有星形胶质细胞或小胶质细胞特性的细胞，外植体原代培养开始后4个月，出现了几种形态的缓慢增殖克隆，并逐渐形成具有均匀外观的细胞。C8-D1A细胞具有纤维状星形胶质细胞的形态，其中一些细胞可以与GFAP抗体反应，因此似乎是星形胶质细胞，未检测到其他神经胶质或小胶质标记物。C8-D1A细胞可以用于3D细胞培养和神经科学研究。

基本信息

细胞别称	C8D1A; Astrocyte type I clone
细胞来源	星形胶质细胞
细胞形态	神经细胞样
细胞类型	自发永生化细胞
生长特性	贴壁细胞
安全等级	BSL1
包装规格	T25瓶或者1mL冻存管包装
倍增时间	2~3天
传代比例	1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
保藏机构	ATCC

【培养保存】
培养体系：DMEM+10%FBS+1%PS
培养条件：气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃
冻存条件：基础培养基+10%DMSO+20%FBS，液氮保存
【传代步骤】
当细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
(1).弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次；
(2).加1ml消化液于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化2-4分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加胰酶3倍体积的培养基终止消化；
(3).用巴氏管轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加入培养液后吹匀；
(4).收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。
【冻存步骤】
（1）.细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入3ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数；
（2）.5min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10(6)/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识；
（3）.将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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